期刊简介
《现代实用医学》前身为《宁波医学》，创刊于1988年，自1994年起公开发行。创刊初期，《现代实用医学》以“立足宁波，服务基层”为宗旨，坚持“严谨、公开、优质、高效”的办刊方针，一抓质量，二抓服务。随着影响面不断扩大，服务能力不断拓展，于2001年起根据杂志发展需要，更名为《现代实用医学》，由浙江省卫生厅主管。
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首页>现代实用医学杂志
- 杂志名称：现代实用医学杂志
- 主管单位：浙江省卫生厅
- 主办单位：宁波市医学会
- 国际刊号：1671-0800
- 国内刊号：33-1268/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中)
HBV耐拉米夫定多聚酶基因变异检测方法的建立
张伟三；丁静娟；门晓燕
关键词：肝炎病毒, 乙型, 拉米夫定, 聚合酶链反应/方法
摘要：目的建立一种简便、准确、实用的乙型肝炎病毒(HBV)耐拉米夫定多聚酶基因变异检测方法. 方法根据已公布的HBV DNA序列,在HBV 多聚酶基因区设计并合成了两对寡核苷酸引物,其中一只为错配引物;应用巢式错配聚合酶链反应(PCR)特异性扩增含有HBV多聚酶基因YMDD基序的片段,扩增产物用限制性内切酶(NdeⅠ)酶切,琼脂糖凝胶电泳,观察酶切后目的片段的限制性片段长度多态性(RFLP)图谱.部分标本进行DNA测序. 结果 (1)所建立的巢式错配PCR-RFLP法,从DNA提取到酶切后电泳分析仅需要11小时;灵敏度高,可以检测到103copies/ml的HBV DNA;特异性强,结果准确,经DNA测序证实.(2)检测20例长期服用拉米夫定的慢性乙型肝炎患者的系列血清,发现YMDD变异者(45%)9例,YMDD野毒株者(55%)11例,表明该法可有效地鉴别HBV YMDD野毒株与变异株. 结论本实验所建立的用于检测HBV耐拉米夫定多聚酶基因变异的巢式错配PCR-RFLP方法简单、敏感、特异,适用于一般实验室及大规模的人群调查.
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